關鍵字:分光光度計;分類及注意事項
分光光度計基本原理是指采用一個可以產生多個波長的光源,通過系列分光裝置,從而產生特定波長的光源,光源透過測試的樣品后,部分光源被吸收,計算樣品的吸光值,從而轉化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。單色光輻射穿過被測物質溶液時,被該物質吸收的量與該物質的濃度和液層的厚度(光路長度)成正比。
分光光度法則是通過測定被測物質在特定波長處或一定波長范圍內光的吸收度,對該物質進行定性和定量分析。常用的波長范圍為:(1)200~400nm的紫外光區,(2)400~760nm的可見光區,(3)2.5~25μm(按波數計為4000cm<-1>~400cm<-1>)的紅外光區。所用儀器為紫外分光光度計、可見光分光光度計(或比色計)、紅外分光光度計或原子吸收分光光度計。為保證測量的精密度和準確度,所有儀器應按照國家計量檢定規程或本附錄規定,定期進行校正檢定。分光光度計的分類有:原子吸收分光光度計、可見分光光度計、熒光分光光度計、紫外可見分光光度計、紅外分光光度計。分光光度計目前已被大范圍應用在治藥、治金、醫藥、食品工業、化工、衛生、學校、石油化工、生物化學、環境保護、質量控制及科研實驗室做化學分析。不同種類的分光光度計有其不一樣的市場應用范圍,分光光度計具有長遠的市場發展前景。
一、分光光度計大致分類:
原子吸收分光光度計:是生產、教育、科研單位等分析實驗室的必備的常用儀器之一。是地質環保、冶金、醫療、食品、化工、農林等行業的材料分析及質量控制部門進行常量、微量金屬(半金屬)元素分析不可缺少的工具,
可見分光光度計:應用在治金、治藥、食品工業、醫藥、衛生、化工、學校、生物化學、石油化工、質量控制、環境保護及科研實驗室等化學分析等領域,可見分光光度計具備透射比、吸光度、濃度直接測定,有自動調0%τ、100%τ功能,可以選配5cm光徑比色架及2.3.5cm矩形比色皿擴大測定范圍。也可配備PC軟件包,經RS232C連接電腦,打印機實施功能擴大。
熒光分光光度計:是用于掃描液相熒光標記物所發出的熒光光譜的一種儀器。適用在化工、科研、生化、醫藥、環保以及食品檢驗、臨床檢驗、教學實驗等相關領域。
紫外可見分光光度計:操作容易、功能齊全、可靠性高,使用方面在國內居領先水平。已廣泛用在藥物分析、藥品檢驗、衛生防疫食品、環境檢測、化工、科研等領域對物質進行定性、定量分析。是生產、科研、教學的不可缺少的儀器。
紅外分光光度計:通常的紅外光譜是指2.5至50微米(對應波數4000--200厘米-1)之間的中紅外光譜,是研究有機化合物z常用的光譜區域。紅外光譜法的特征是:試驗迅速、樣品量少(幾微克至幾毫克),特征性強(各種物質都有其各自不同的紅外光譜圖)、可以分析各種狀態(如:氣、液、固)的試樣,另外對樣品保存完好。紅外分光光度計是物理、化學、生物、地質、醫學、紡織、環保及材料科學等的重要儀器。
1.使用的吸收池必須潔凈,并注意配對使用。量瓶、移液管均應校正、洗凈后使用。
二、使用時注意事項:
2.取吸收池時,手指應拿毛玻璃面的兩側,裝盛樣品以池體的4/5為度,使用揮發性溶液時應加蓋,透光面要用擦鏡紙由上而下擦拭干凈,檢視應無溶劑殘留。吸收池放入樣品室時應注意方向相同。用后用溶劑或水沖洗干凈,晾干防塵保存。
3.供試品溶液濃度除各該品種已有注明外,其吸收度以在0.3~0.7之間為宜。
4.測定時除另有規定外,應以配制供試品溶液的同批溶劑為空白對照,采用1cm石英吸收池,在規定的吸收峰±2nm以內,測幾個點的吸收度或由儀器在規定的波長附近自動掃描測定,以核對供試品的吸收峰位置是否正確,并以吸收度z大的波長作為測定波長,除另有規定外吸收度z大波長應在該品種項下規定的測定波長±2nm以內。
5.供試品應取2份,如為對照品比較法,對照品一般也應取2份。平行操作,每份結果對平均值的偏差應在±0.5%以內。
6.選用儀器的狹縫寬度應小于供試品吸收帶的半寬度,否則測得的吸收度值會偏低,狹縫寬度的選擇應以減少狹縫寬度時供試品的吸收度不再增加為準,對于大部分被測品種,可以使用2nm縫寬。
分光光度計是精密儀器,正確安裝、使用及保養對保持儀器良好的性能和保證測試的準確度具有重要作用。為了保證測試結果的準確性及可靠性,新制造、使用中和修理后的分光光度計都應定期進行檢定。檢定不合格的儀器還要進行及時調整。
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